Ферлавирус (дополнение)

Данная статья является неким дополнением к статье о парамиксовирусе (OPMV) с результатами новых исследований, полученных в середине 10х-начале 20х.

Ферлавирусы являются важными патогенами змей и других рептилий. Они вызывают респираторные и неврологические заболевания у инфицированных животных и могут вызывать тяжелые вспышки заболеваний. Изоляты этого рода можно разделить на четыре геногруппы – А, В и С, а также на более отдаленную сестринскую группу – «черепаховую». Отмечено, что А и В группа встречается и у черепах и чешуйчатых, а вот С группа только у чешуйчатых.

Вирус, связанный первоначальной вспышкой, был назван вирусом Фер-де-Ланса (FDLV), а затем описан как парамиксовирус офидия (ПМВ). Сегодня этот и родственные вирусы отнесены к роду Ferlavirus семейства Paramyxovirus. Ферлавирусы были обнаружены у многих видов змей. Клинические признаки в основном затрагивают дыхательную и центральную нервную систему. Также распространены анорексия, истощение и внезапная смерть. Выраженность признаков выявлена различная в зависимости от конкретной вспышки (штамма). Считается, что развитие заболевания зависит от вируса, хозяина и факторов окружающей среды. Имеются данные о передаче отдельных штаммов между родами и семействами рептилий.

Ранние эксперименты:

1. Пять гремучих змей (Crotalus durissus unicolor) интратрахеально инокулировали изолятом культурой клеток с ферлавирусом. У всех змей развилось тяжелое интерстициальное заболевание легких, включая пролиферацию и вакуолизацию эпителия фавеол. Те животные, которых не подвергли эвтаназии, погибли между 19 и 22 днями после инфицирования. Кубовидная метаплазия и гипертрофия респираторных эпителиальных клеток I типа и гипертрофия респираторных эпителиальных клеток II типа, повышенная секреторная активность II типа клеток, десквамация клеток респираторного эпителия, инвазия бактериальными возбудителями, инфильтрация интерстиция с гетерофилами, а также лимфоцитами, гистиоцитами и плазматическими клетками, отек, отложение фибрина и, в зависимости от стадии воспаления, фиброзная метаплазия легочной ткани - были общей картиной у испытуемых.
2. У инфицированных бирманских питонов ( Python molurus ) сравнили гистологические и ультраструктурные характеристики и морфологию легких со здоровыми питонами. Были отмечены массивное утолщение аэрогематического барьера и уменьшение легочной массы у инфицированных змей, а также уменьшение обменной способности легких. Обнаружена гиперплазия мерцательных клеток и пневмоцитов II типа, эпителий выглядел от псевдослоистого до многослойного, зарастая фавеолярными капиллярам
3. В ходе исследования змей с ферм тайланда, было обнаружено, наличие ферлавируса у 9% больных животных, так же отмечено наличие ферлавируса в гемипенисах, что дает нам еще один путь передачи заболевания через половой акт.

Также ферлавирусы вызывают негнойный менингоэнцефалит или демиелинизацию и дегенерация пластинок аксонов. А также поражают поджелудочную железу, что приводит к панкреатиту и/или ее некрозу. Сопутствующие вирусы (аденовирусы и ретровирусы), комбинация штаммов ферлавируса и инвазия бактериями, особенно сальмонеллой, усиливают течение болезни и риск летального развития.

Проведенные позже клинические испытания на модельном организме (Pantherophis guttatus) различных штаммов\групп ферлавируса, показали следующие результаты:

Группа А -за 49 дней не погибло ни одно животное, воспалительная реакция в легких умеренная. В трахеи частицы были обнаружены на 28 день и слизистый секрет на 49 день в полости рта. Легкое утолщение ткани легкого, мультифокальную лимфоплазмоцитарную инфильтрацию интерстиция, фибрин в фавеолярном пространстве, а также гемосидероз и пигментный нефроз в других органах. Бактерии в тканях не были обнаружены, единично - Salmonella.

Группа В - тяжелое клиническое состояние наблюдалось уже на 16 день, смерть на 27-35 день. Тяжелое воспаление легких отмечается к 16 дню, включает также гнойный секрет, шумы при дыхании, апатия, специфическое положение тела и внезапную смерть. Сильное утолщение и красноватый цвет ткани, а также желтоватый тягучий секрет в просвете легких, тяжелая гетерофильная и лимфоплазмоцитарная инфильтрация интерстиция, а также фибрин в фавеолярные пространства. Гемосидероз и пигментный нефроз, негнойный гепатит, реактивный спленит. Изредка энтерит, эпикардит, некротический панкреатит. Были обнаружены бактерии Salmonella, Citrobacter freundii и Klebsiella pneumoniae.

Группа С- треть испытуемых умерло от острой тяжелой клиники с 27 по 37 день. Остальные имели либо легкое либо средне-тяжелое течение болезни. Легкое изменение ткани было единичным, остальные образцы показали сильное утолщение тканей и наличие большого количества беловатых или желтоватых частиц или пенистых или тягучих выделений к 27 дню. У большинства к 49 дню наблюдалась легкая форма и у трети тяжелая форма изменения легочной ткани. Пигментный нефроз обнаружен у трети змей и у трети у змей наблюдался спленит. У большинства бактерии не были обнаружены, у трети - Citrobacter freundii, единично - Salmonella

Проведенное большое количество исследований о патогенности штаммов показало, что штамм А обладает самым сильным иммунным ответом, а штамм В - самым слабым и это относит штамм В, как штамм с наибольшей вирулентностью. Увеличение лейкоцитов происходит в промежутке между 4-16 днями после заражения, а гуморальный ответ - 16-28 дней.

Проведенные сравнительные эксперименты группы В на королевском питоне (Python regius), показали, что, по сравнению с кукурузными змеями, у питонов наблюдались более легкие клинические признаки и патологические изменения, но более быстрое развитие и более высокие титры антител, а также гематологическая реакция с преобладанием лимфоцитоза в отличие от гетерофилии у кукурузных змей. После инвазии, ферлавирус был обнаружен сначала в легких на 4-й день и быстро распространился на кишечник, поджелудочную железу, почки и мозг. Гематологические исследования показали увеличение количества циркулирующих лимфоцитов, пик которого достигался на 28-й день. Что делает боид более устойчивыми к ферлавирусу, чем ужеобразных. Уровень антител снижается примерно через шесть месяцев.

Ферлавирусы быстро распространяются в ткани, включая мозг, что говорит о виремии. А также развитии внелегочной формы у менее агрессивных штаммов с поражением ЦНС, печени, поджелудочной и почек. Общий средний уровень выявления составил 72% и был самым высоким на 16-й день. Выделение через клоаку наблюдалось только на 28-й день. Для прижизненного отбора проб рекомендуется использовать образец смыва из трахеи, для посмертной диагностики следует исследовать объединенное исследование органов. Но стоит отметить, что в случае развития внелегочной или легкой легочной формы заболевания, эффективность диагностики ферлавируса методом ПЦР смывом с трахеи падает до 40% (штамм А в частности). Наиболее вирулентный штамм (группа В) приводит к 100% положительной инвазии всех зараженных. Некоторые змеи, зараженные менее агрессивными штаммами, смогли справится с развитием вирусной инфекции.

Змеи с хронической формой заболеванием обычно страдают анорексией и срыгиванием и слабы, истощены и имеют плохой мышечный тонус. В течение нескольких месяцев у них может развиться: диарея, респираторные и неврологические симптомы (тремор головы, вялый паралич или судороги.)

Исследование змей как местных видов, так и видов в коллекции в Коста-Рике (150 особей из 16 видов Vipiridae в 9 коллекциях) и Бразилии (Viperidae, Boidae и Colubridae: 69 содержащихся в неволе и 17, только что прибывших из природы, происходящих из трех юго-восточных регионов Бразилии), обнаружили, что антитела к ферлавирусу были найдены у всех видов змей, как местных, так и в коллекциях (Бразилия). А также то, что штаммы (вирус Бушмейстера и неотропический вирус) ферлавируса принадлежат к группе А и антитела к этим штаммам были обнаружены у 30% змей в коллекции (Коста-Рика).

Интересно, что виды Crotalus durissus terrificus имеют большее количество антител, чем остальные изученные виды (в исследовании выше (Бразилия)), независимо от происхождения и типа жилища. У этого вида наблюдалось значительное увеличение количества антител у особей, обитающих группой, по сравнению с теми, кто сидел одиночно. Что подтверждает половой способ передачи вируса. Однако неизвестно наличие антител против OPMV связано с иммунной резистентностью или же вирус присутствует у змей, что делает возможным рецидивы заболевания в будущем.

Исследование 52 ферм в Китае в провинции Гуанси (104 особи змей разных семейств с респираторными заболеваниями) обнаружило ферлавирус у 70 особей в 32 фермах, отягощённых бактериальным сопутствием (1\5 Salmonella и 1\6 Proteus). Ферлавирус принадлежал ко всем трем геногруппам (А, В, С)

Ферлавирусы широко распространены в природе, возможно, в ряде локалитетов и у ряда видов являются условно-патогенной нормофлорой. Клинические вспышки заболевания в террариумных коллекциях у низко вирулентных штаммов вируса связаны с депривацией иммунной системы при нарушении содержания или у ослабленных особей и особей со слабой иммунной системой изначально. Вирус передается воздушно-капельным (мелкие частицы слюны, касание языка каловых масс), воздушно-пылевым (высохшие каловые массы) и половым путем. Высок риск распространение вируса при кучном содержании животных (совместное содержание в первую очередь, соседние контейнеры \террариумы в стеллажах), при несоблюдение гигиены (уборка) и дезинфекции (руки, инструменты, губки). Фермы по передержке чаще всего являются рассадником вирусной инфекции от заболевших животных к здоровым, в случае появления животного с клинической симптоматикой.

Detection and molecular epidemiology of ferlaviruses in farmed snakes with respiratory disease in Guangxi Province, China Jie-Yu Su, Jun Li, Teng-Cheng Que, Hai-Lan Chen, Yun Zeng (2020)

Epizootic reptilian ferlavirus infection in individual and multiple snake colonies with additional evidence of the virus in the male genital tract Chutchai Piewbang, Sabrina Wahyu Wardhani, Panida Poonsin, Jakarwan Yostawonkul, Poowadon Chai‑in, Sitthichok Lacharoje, Thanyarat Saengdet, Taksa Vasaruchapong, Suwimon Boonrungsiman, Piyaporn Kongmakee, Wijit Banlunara, Anudep Rungsipipat, Tanit Kasantikul8 & Somporn Techangamsuwan (2021)

Immunologic responses in corn snakes ( Pantherophis guttatus ) after experimentally induced infection with ferlaviruses Annkatrin Neul, Wieland Schrödl, Rachel E Marschang, Laboklin GmbH, Tina Bjick (2017)

Ophidian paramyxovirus: a serum epidemiological study in captive snakes Cristiano Correa De Oliveira, Leonardo Melo, Leila Ullmann, Camila Malossi. (2019)

Paramyxovirus. In: Mader DR, editor. Reptile Medicine and Surgery, 2 nd edition. Bronson E and Cranfield MR. (2006)

Paramyxoviruses in reptiles: A review. Vet Micro Hyndman TH, Shilton CM, Marschang RE (2013)

The Role of Host Species in Experimental Ferlavirus Infection: Comparison of a Single Strain in Ball Pythons (Python regius) and Corn Snakes (Pantherophis guttatus) Michael Pees, Volker Schmidt, Annkatrin Neul, Wieland Schroedl, Rachel E. Marschang (2023)

Three genetically distinct ferlaviruses have varying effects on infected corn snakes (Pantherophis guttatus) Michael Pees, Volker Schmidt, Tibor Papp, Akos Gellert, Maha Abbas, J.Matthias Starck, Annkatrin Neul, Rachel E. Marschang (2019)

SEROPREVALENCE and MOLECULAR CHARACTERIZATION of FERLAVIRUS in CAPTIVE VIPERS of Costa Rica Cristina Solis, Randall Arguedas, Mario Baldi, Martha Piche, Carlos Jimenez (2017)

Virus distribution and detection in corn snakes (Pantherophis guttatus) after experimental infection with three different ferlavirus strains Michael Pees, Volker Schmidt, Annkatrin Neul, Kristin Müller, Uwe Truyen, Nadja Leinecker, Rachel E. Marschang (2015)