Причины ложноотрицательной прямой пробы Кумбса (антиглобулиновый тест).
Гелевая методика
Для проведения прямого антиглобулинового теста используют, например, гелевые карты, содержащие моноспецифичные pеаrенты античеловеческого глобулина (т.е. анти-IgG, -IgA, -IgM, -С3с, -C3d и ареактивный контроль). При этом методе отсутствует фаза отмывки, что позволяет выявить низко- аффинные IgG-, IgA-, IgM-антитела. С помощью гелевых карт удается распознать и редкую, обусловленную исключительно IgA, аутоиммунную гемолитическую анемию.
Есть несколько причин, приводящих к получению ложноотрицательных результатов
1.Недостаточно отмытые эритроциты
При этом реактив Кумбса нейтрализуют иммуноглобулины или комплемент плазмы крови пациента;
Сейчас для скрининговой диагностики аутоиммунной гемолитической анемии используют полиспецифичные реагенты античеловеческого глобулина «широкого спектра». Указанные реагенты содержат антитела к человеческому lgG, компоненту комплемента С3d и обладают малой активностью к IgA и IgM.
- По некоторым сообщениям, частота тепловой формы аутоиммунной гемолитической анемии, опосредованной только IgA, составляет до 2,5%.
Таким образом, при использовании в скрининговых исследованиях, указанных выше полиспецифичных реагентов диагноз может быть не установлен.
Приблизительно у 2-6% пациентов с клиническими и гематологическими проявлениями аутоиммунной гемолитической анемии результаты прямого антиглобулинового теста отрицательны даже при повторных исследованиях.
- При проведении реакции в пробирках низкоаффинные IgG-антитела в процессе отмывки отрываются от эритроцитов, приводя к отрицательному результату прямого антиглобулинового теста.
Другой вариант - эритроциты могут быть покрыты небольшим количеством молекул IgG, недостаточным для выявления, поскольку для пробирочной методики необходимо наличие 300-4000 молекул на каждый эритроцит. В таком случае положительный результат прямой антиглобулиновой реакции можно получить при использовании более чувствительных методик, или проточная цитометрия. Если используют полиспецифичный античеловеческий глобулин, и результат прямого антиглобулинового теста остается отрицательным при достоверных клинических признаках гемолиза, для дальнейшего исследования используют более чувствительные методики.
Источник: Иммунные гемолитические анемии. Дифференциальный диагноз. Занятие №3 декабря (2022). Смотреть весь урок→
Трейлер урока: