Пособие по ихтиопатологии для коммерческих учреждений.

ПРЕДИСЛОВИЕ.

Если вы уже опытный аквариумист и задумываетесь о том, чтобы превратить своё хобби в нечто большее, возможно, вы мечтаете открыть магазин или салон аквариумов, профессионально заняться разведением рыб или даже создать карантинную передержку для рыб, ввезённых из-за границы.

Как разумный человек, вы, вероятно, задаётесь вопросом: «С чего начать? Как избежать подводных камней в работе с живым товаром? Какова реальная экономическая составляющая этого бизнеса?» и так далее.

На практике оказывается, что знаний, полученных в бытовом любительском аквариумизме, совершенно недостаточно для организации такого специфического и рискованного бизнеса. Главная сложность заключается в том, что вы работаете с живым товаром, а всему живому свойственно погибать. Без чёткого понимания всех нюансов этой сложной профессии вас, скорее всего, ждёт неудача.

Я не рассматриваю владельцев зоомагазинов с небольшими отделами аквариумистики. Обычно эти отделы считаются второстепенными и не приносят значительного дохода. Владельцы таких магазинов не стремятся получить дополнительные знания в области аквариумистики и часто негативно высказываются о поставщиках, утверждая, что они поставляют им больных рыб. Или же пытаются переложить ответственность за неудачи на сотрудников магазина. Но возникает вопрос: а кто обычно работает в таких магазинах? Ведь в России не наберется и двухсот человек, которые могли бы считаться настоящими профессионалами в области аквариумистики. Да и работать продавцами они уж точно не станут. И вот так замыкается круг. Ни одна карантинная передержка не может гарантировать вам сохранность живого товара дольше, чем на трое суток. Для этого существует множество причин и факторов, в которых должны разбираться все участники этого процесса. Живая рыба — это не керамические украшения, которые стоят у вас на витрине. Особенно учитывая, что рыбы появились около 500 миллионов лет назад и являются предками всех четвероногих. Они живут в совершенно другой среде, чем домашние млекопитающие и птицы. Эти существа, слабые, древние, и умирают молча. А карантинные передержки являются коммерческими организациями и не могут позволить себе наблюдать за рыбой месяцы и годы, до тех пор пока все скрытые патогены будут выявлены.

Чтобы создать мини-лабораторию, не нужно много денег и большого пространства. Даже небольшой аквариумный магазин может себе это позволить. К сожалению, в нашей стране не так много профессиональных ихтиопатологов, а их услуги могут быть довольно дорогими. Особенно это касается небольших городов. Поэтому владельцу магазина, разводни или карантина, придётся учиться самостоятельно. Ведь если владелец не хочет этого делать, то возникает вопрос о правильности выбора его сферы деятельности.

ВВЕДЕНИЕ.

Не буду скрывать, что к специалистам с ветеринарным образованием следует предъявлять повышенные требования, так как ихтиопатология — это одна из дисциплин ветеринарной медицины. Однако, учитывая узкую направленность советского (российского) образования в этой области, стоит отметить, что знания наших ветеринаров в основном ограничиваются проведением ветсанэкспертизы промысловых видов рыб. К тому же, ни один ВУЗ в нашей стране не готовит специалистов по ихтиопатологии на должном уровне. Это является ещё одной причиной, по которой стоит задуматься о самообразовании или повышении квалификации. Следует признать, что даже очень талантливым ветеринарным врачам порой сложно получить необходимый опыт в области ихтиопатологии тропических видов рыб. Для этого требуется обширная и многолетняя практика, которую можно получить только на крупной карантинной передержке. Здесь специалисты имеют возможность постоянно наблюдать за сезонными изменениями патогенности, сталкиваются с разнообразными бактериальными, вирусными и паразитарными заболеваниями, разрабатывают и тестируют различные методы лечения и многое другое.

Итак, с чего следует начать? А начать следует с выбора подходящего микроскопа.

Существует три основных вида микроскопов:

1. Оптический микроскоп. Увеличивает объект благодаря оптическому объективу с окуляром.
2. Электронный микроскоп. В нём используется пучок электронов. В таких микроскопах установлены электронно-оптические линзы.
3. Цифровой микроскоп. Позволяет не только наблюдать за образцом, но и делать его снимки, делиться ими с другими пользователями.

У каждого из видов микроскопов есть свои преимущества и недостатки.

Для проведения патанатомического исследования влажного препарата в условиях небольшой любительской лаборатории наилучшим выбором станет оптический микроскоп. Оптические микроскопы — это самые распространённые микроскопы, которые используют свет проходящий через образец для получения изображения. Они могут быть как очень простыми, так и сложными, с множеством линз, направленных на улучшение разрешения и контрастности.

Оптические микроскопы можно разделить на два основных типа: простые и сложные. Простые микроскопы оснащены одной линзой (например, увеличительным стеклом), которая обеспечивает увеличение. Сложные микроскопы имеют несколько линз, что позволяет добиться более высокого разрешения и детализации изображения. Они часто оснащены цифровой камерой, что даёт возможность наблюдать за образцом на компьютере и проводить глубокий анализ микроскопических изображений.

Оптические микроскопы могут увеличивать примерно в 2000 раз, достигая теоретического предела разрешения в 0,250 микрометров. Однако, в последнее десятилетие развитие сверхразрешённой флуоресцентной микроскопии позволило оптической микроскопии выйти на наноуровень.

Окуляр — это система из нескольких линз (обычно 2–3), через которые исследователь наблюдает за изучаемым объектом. Линзы заключены в металлический корпус, известный как тубус. Окуляры могут иметь фиксированное или фокусное увеличение.

Самая нижняя линза служит для фокусировки на объекте, а верхняя — для наблюдения за ним. Все окуляры обеспечивают определённую кратность увеличения, например, 10x, 20x, 25x и так далее.

Объектив — это важнейшая часть микроскопа, которая отвечает за создание микроскопического изображения исследуемого предмета. Он точно передаёт мельчайшие детали, цвет и структуру объекта, позволяя пользователю рассмотреть то, что недоступно человеческому глазу.

Конструкция объектива представляет собой сложное оптико-механическое устройство, состоящее из нескольких линз и других компонентов. Количество линз зависит от задач, для решения которых создаётся прибор, и может достигать 14 штук. Сложные и дорогие планапохроматические объективы, применяемые в биологии и медицине, могут включать до 14 линз. Для изучения растений, веществ и тканей подойдут ахроматические объективы, состоящие всего из 2–3 линз.

Общее увеличение микроскопа высчитывается путем сложения кратности окуляров и объективов. Например, если кратность окуляра составляет 10x, а объектива 90x, то общее увеличение будет иметь кратность 900x.

Подсветка

Это не менее важная часть микроскопа, позволяющая подсветить объект изучения. Чаще всего состоит из двух частей: коллектора и конденсора. Конденсор имеет несколько встроенных линз и предназначен для увеличения количества света, исходящего от осветителя. Коллектор же располагается между объектом изучения и конденсором и помогает регулировать интенсивность освещения.

Источником освещения в подсветке выступают галогенные лампы, светодиоды, зеркала или лампы накаливания. В конструкции микроскопа подсветка может иметь верхнее, нижнее расположение или же быть комбинированной (верхняя и нижняя). Верхняя располагается над предметным столиком и нужна для того, чтобы рассмотреть непрозрачные или полупрозрачные предметы. Нижняя же находится под столиком и нужна для изучения прозрачных объектов, на которые направляется пучок света. Подсветка нуждается в питании от сети, через USB или батареек.

Тип визуальной насадки

Существуют различные типы насадок: монокулярные, бинокулярные и даже тринокулярные. Монокулярная насадка оснащена одним окуляром, в то время как бинокулярная — двумя. Два окуляра обеспечивают более качественное изображение по сравнению с одним, но их использование требует определенного навыка.

Тринокулярная насадка, помимо двух окуляров, имеет дополнительную трубку, на которую можно установить камеру. Это позволяет передавать изображение на монитор компьютера, что открывает новые горизонты для любителей фотографии.

Минимальное оптическое увеличение высчитывается путем сложения кратности окуляров и объективов. Например, если минимальная кратность и у окуляра, и у объектива составляет 10х, то минимальное оптическое увеличение будет составлять 100х. Это дает не совсем четкую картинку, но с широким полем зрения.

Как правило, фокусировка в микроскопах бывает грубой и точной.

• Грубая выполняется специальным винтом (макровинт), который позволяет изменять расстояние между объективом и предметом исследования.
• Тонкая фокусировка (микровинт) поможет сфокусироваться на предмете до сотых долей увеличения, придать ему резкости и рассмотреть его в мельчайших деталях.

Револьверная головка — это устройство, напоминающее револьвер, в котором располагаются объективы. В некоторых моделях может быть всего лишь один объектив, но чаще всего встречаются головки с двумя, тремя или четырьмя объективами. Когда пользователю необходимо использовать определенный объектив, он просто поворачивает головку, выбирая нужный.

Расстояние между зрачками измеряемое в миллиметрах. Данная характеристика относится к микроскопам с бинокулярной насадкой. Чтобы создать стереокартинку или единое поле, в котором оба глаза будут видеть предмет изучения, нужно провести несложные настройки. Для этого первоначально необходимо настроить резкость окуляров, а затем свести изображение воедино, поворачивая тубусы, в которые встроены окуляры. Если все сделано правильно, то оба глаза должны видеть единое поле, без затемнения центра или краев изображения.

Я рекомендую сразу выбирать микроскоп для профессиональных исследований и обратить внимание на приборы, дающие максимальное увеличение не менее 400х. Это нижняя, необходимая для эффективной работы ихтиопатолога граница. Верхней же границы не установлено и можно выбирать прибор с увеличением в несколько тысяч крат, например, в 2000x. Для серьезных исследований обязательно наличие в револьверной головке 100-кратного объектива.

Патоморфологическая и дифференциальная диагностика болезней рыб.

Прежде чем изучать болезни рыб, необходимо ознакомиться с их анатомией. Каждому сотруднику, работающему с живой рыбой, было бы полезно иметь хотя бы базовые знания об устройстве организма этих животных.

В скелете рыб можно выделить две основные части: осевой скелет и скелет плавников.

Осевой скелет состоит из позвоночника, рёбер и черепа.

Позвоночник рыб образован отдельными позвонками, между которыми находится хрящевая прослойка. Верхние дуги позвонков формируют позвоночный канал, защищающий спинной мозг.

Позвоночник делится на два отдела: туловищный и хвостовой. Туловищные позвонки имеют рёберные отростки по бокам, к которым крепятся рёбра. Хвостовые позвонки, помимо верхней дуги, также обладают нижней, которая служит защитой для крупного кровеносного сосуда — брюшной аорты. От дуг позвонков отходят заострённые остистые отростки, к которым крепятся мышцы, изгибающие тело.

Скелет головы рыб состоит из мозгового черепа, челюстных костей и жаберных дуг. Верхнечелюстные кости не срастаются с черепной коробкой, что даёт рыбам возможность вытягивать челюсти, широко раскрывать рот и изменять объём ротовой полости. Это позволяет им заглатывать крупную добычу.

Скелет непарных плавников состоит из тонких длинных косточек, скрытых в толще мышц, и выступающих наружу лучей, которые к ним крепятся. Скелет парных плавников у разных групп рыб имеет свои особенности, но в нём всегда можно выделить два основных элемента: пояс конечности, который служит опорой для плавника, и свободную конечность.

У костных рыб пояс передних конечностей (грудных плавников) соединён с задним отделом мозгового черепа. Пояс задних конечностей (брюшных плавников) образован двумя сросшимися костями и свободно располагается в толще мышц. Лучи плавников крепятся к поясам конечностей через мелкие основные косточки.

Фиолетовым цветом на рисунке выделен скелет пояса передних конечностей и грудных плавников, розовым — скелет пояса задних конечностей и брюшных плавников, а голубым — осевой скелет и скелет непарных плавников.

Скелетная мускулатура рыбы образована поперечнополосатыми мышцами. В области туловища и хвоста преобладает метамерное строение, что проявляется в наличии W-образных мышечных сегментов. Функция этих мышц заключается в изгибании тела.

Движения конечностей, челюстного аппарата и жаберных крышек осуществляются специализированными группами мышц, которые не обладают метамерным строением.

Кровеносная система у рыб замкнутая, а сердце состоит из двух камер: предсердия и желудочка. У рыб имеется только один круг кровообращения.

Артериальная кровь богата кислородом, в то время как венозная, напротив, бедна кислородом и насыщена углекислым газом.

Венозная кровь поступает в предсердие, откуда затем выталкивается в желудочек, а оттуда — в брюшную аорту. Обратному току крови препятствуют сердечные клапаны. По брюшной аорте кровь поступает к жабрам, где аорта разветвляется на сеть капилляров. В этих капиллярах происходит газообмен, и кровь насыщается кислородом.

После выхода из жабр капилляры собираются в спинную аорту, по которой и её разветвлениям артериальная кровь разносится к тканям и органам. Здесь, через стенки капилляров, вновь происходит газообмен. Насыщенная углекислым газом кровь собирается в вены и возвращается в предсердие.

Пищеварительный тракт начинается с ротового отверстия, которое ведет в ротовую полость, а затем в глотку, пищевод, желудок, тонкую кишку и заднюю кишку, которая заканчивается анальным отверстием, выводящим отходы наружу.

Челюстные кости обычно имеют недифференцированные зубы. В некоторых случаях зубы также могут присутствовать на жаберных дугах, костях черепной коробки и в глотке.

Слюнных желез у рыб нет, а в тонкую кишку открываются протоки печени и поджелудочной железы.

Органы дыхания рыб — жабры, тонкостенные выросты, которые образуются в процессе эмбрионального развития в жаберных щелях глотки. У костных рыб жабры защищены жаберными крышками, у других отверстия жаберных щелей открываются наружу.

Жабры состоят из элементов скелета (хрящевых жаберных дуг) и жаберных лепестков, в которых под тонким эпителием находится сильно разветвлённая капиллярная сеть. В ротоглоточной полости рыб вода постоянно сменяется благодаря движению жаберных крышек: она поступает через ротовое отверстие, проходит между жаберными дугами, омывает жаберные лепестки и выходит наружу из-под жаберных крышек. Постоянный приток свежей воды обеспечивает интенсивный газообмен.

На внутренней стороне жаберных дуг, прямо напротив жаберных лепестков, расположены жаберные тычинки. Они выполняют важную функцию — защищают жабры от загрязнений, задерживая частички, которые попадают в ротоглоточную полость вместе с водой. У рыб, питающихся планктоном или детритом, жаберные тычинки развиты особенно сильно, так как они фильтруют пищевые частицы.

Некоторые рыбы могут дышать не только с помощью жабр, но и с помощью других органов. Например, двоякодышащие рыбы имеют парные пузыри, которые служат им лёгкими. Эти пузыри открываются на брюшной стороне пищевода, позволяя сохранять проглоченный увлажнённый воздух. Лабиринтовые рыбы могут дышать воздухом с помощью особого лабиринтового органа — складчатой наджаберной полости.

Основным органом выделительной системы рыб являются туловищные почки. В процессе выделения также участвуют жабры. Основные продукты азотистого обмена рыб — это растворимые в воде вещества, такие как аммиак и мочевина. Поэтому при лечении рыб растворенными в воде препаратами крайне важно отказаться от кормления, чтобы снизить нагрузку на выделительную систему.

Экстерорецепция. Боковая линия.

Органы боковой линии — это уникальное явление, присущее только рыбам и амфибиям, которые обитают в водной среде. Они представляют собой специализированные кожные сейсмосенсорные образования, связанные с центральной нервной системой через блуждающий нерв.

Боковая линия может быть полной, то есть простираться вдоль всего тела, или неполной, а иногда и вовсе отсутствовать. Однако в последнем случае у рыб сильно развиваются головные каналы, как, например, у сельдей.

С помощью боковой линии рыбы ощущают изменение давления текущей воды, вибрации низкой частоты, инфразвуковые колебания и электромагнитные поля. Они способны обнаруживать поверхностные волны, течения, а также неподвижные подводные объекты, такие как скалы и рифы, и движущиеся предметы, включая врагов и добычу.

Боковая линия — это невероятно чувствительный орган. Например, акулы улавливают движение рыб на расстоянии 300 метров, а проходные рыбы ощущают даже незначительные токи пресной воды в море.

Нейросекреторные железы играют ключевую роль в процессе адаптации рыб к изменяющимся условиям окружающей среды. К числу важнейших отделов промежуточного мозга относятся эпифиз, гипоталамус и гипофиз.

Эпифиз

У некоторых видов рыб эпифиз не только реагирует на свет, но и участвует в регулировании интенсивности окраски. Для костистых рыб характерна незавершенность процесса превращения эпифиза из фоточувствительного органа в эндокринную железу.

Функции эпифиза связаны с поддержанием циркадных (суточных) ритмов организма. Он также играет роль в сезонных изменениях обмена веществ, которые происходят в ответ на увеличение светового дня весной и уменьшение осенью.

В эпифизе были обнаружены гормоны серотонин, мелатонин и адреногломерулотропин — низкомолекулярные органические соединения, являющиеся производными аминокислоты триптофана. Серотонин вызывает сужение мелких артериол, усиливает моторику кишечника и служит медиатором в некоторых синапсах. Адреногломерулотропин стимулирует секрецию кортикоидов, таких как альдостерон, который, в свою очередь, регулирует почечную секрецию. Мелатонин, в свою очередь, выступает одним из посредников, влияющих на рост организма. Он тормозит развитие половых желез, а также вызывает сокращение меланофоров и побледнение кожи.

Гипоталамус и гипофиз рассматриваются как единая нейросекреторная система.

Щитовидная железа — это орган, который обычно состоит из множества фолликулов. Фолликулы представляют собой полости, выстланные кубическим эпителием.

У круглоротых и костистых рыб фолликулы находятся в соединительной ткани и не образуют компактного органа. У круглоротых они располагаются вдоль жаберных артерий и брюшной аорты, а у костистых — в области глотки, брюшной аорты, жаберных артерий, а иногда даже в кишечнике, селезёнке, головной почке (у карпа) и мозге. У хрящевых и двоякодышащих рыб щитовидная железа представлена компактным органом.

Поджелудочная железа — важный орган, выполняющий две ключевые биохимические функции:

Первая функция заключается в биосинтезе ферментов, таких как трипсин, химотрипсин и карбоксипептидаза. Эти ферменты выделяются в кишечник, где участвуют в процессе переваривания пищи. За эту функцию отвечают экзокринные клетки, которые секретируют ферменты в проток поджелудочной железы.

Вторая функция поджелудочной железы — секреция инсулина и других пептидных гормонов, регулирующих обмен питательных веществ. Эта функция осуществляется эндокринной тканью железы, которая представляет собой скопление специализированных клеток, известных как островки Лангерганса.

Островки Лангерганса содержат несколько типов клеток, близких по происхождению, каждая из которых продуцирует только один гормон. Например, гормон глюкагон вырабатывается А-клетками, инсулин — В-клетками, а соматостатин — D-клетками.

У хрящевых рыб поджелудочная железа имеет компактный вид. У костистых рыб клетки Лангерганса распределены по всей поджелудочной железе, а также в области желчного пузыря, селезенки, тонкой кишки и пилорических отростков. У некоторых рыб, таких как морской черт и скорпена, образуется небольшой орган, состоящий исключительно из эндокринных элементов — брокмановское тельце.

Гормон инсулин играет важную роль в углеводном обмене, способствуя образованию гликогена из глюкозы в печени и мышцах. Он снижает уровень сахара в крови и ускоряет процесс окисления глюкозы в мышцах и других тканях.

Глюкагон, напротив, считается антагонистом инсулина. Он активирует распад гликогена в печени и выделение глюкозы в кровь. Соматостатин, в свою очередь, действует на жировую ткань, стимулируя высвобождение некоторых липидов.

Несмотря на то, что глюкагон и соматостатин также играют свою роль в обмене веществ, особенно углеводов, основным гормоном поджелудочной железы остается инсулин. Он регулирует водный обмен в организме, облегчает переход глюкозы из крови в клетки, тормозит активность ферментов, расщепляющих гликоген в печени, и стимулирует процессы синтеза гликогена, жиров и белков.

Хромаффиновые железы .

Хромаффинная ткань у рыб представляет собой аналог мозгового слоя надпочечников. Она берёт своё начало от клеток симпатической нервной системы и вырабатывает гормоны, которые одновременно служат медиаторами для нервных окончаний симпатических нервов.

У круглоротых рыб хромаффиновые клетки располагаются по сегментам вблизи аорты, кардинальных вен, сегментарных сосудов и в сердечной мышце. У хрящевых рыб они располагаются метамерно, в виде парных тел в каждом сегменте, с обеих сторон позвоночника вдоль аорты, простираясь от проксимального края сердца до проксимального края почек. У костистых рыб эта ткань локализуется в области задних кардинальных вен. Хромаффиновые клетки вырабатывают гормоны адреналин и норадреналин. Адреналин и норадреналин – это водорастворимые амины, образующиеся из аминокислоты тирозин. Промежуточным продуктом превращения тирозина в адреналин и норадреналин является дофамин.

Половые железы.

Половые гормоны, такие как андрогены у самцов и эстрогены у самок, представляют собой стероидные вещества, подобные кортикоидам. У самцов они вырабатываются в интерстициальных клетках семенника, а у самок — в клетках фолликулярного эпителия.

Половые гормоны самок включают эстрогены и прогестерон. В крови они находятся в связанном виде с белками. Наиболее активными эстрогенами являются эстрадиол и эстрон. Эти гормоны определяют половый цикл, влияют на синтез белка и нуклеиновых кислот, а также на обмен углеводов и пуриновых соединений.

Прогестерон, известный как гормон желтого тела, в организме самок служит предшественником как тестостерона, так и эстрадиола.

Из андрогенов наиболее активным является тестостерон. Эти гормоны играют важную роль в регулировании поведения самцов, формировании брачного наряда и развитии гоноподий у некоторых живородящих рыб. Они ускоряют рост тканей и синтез белков, повышают интенсивность эритропоэза (образование эритроцитов) и усиливают кровоток в тканях.

В низкой концентрации андрогены стимулируют сперматогенез, а в более высокой — тормозят его. Добавление андрогенов в корм рыб может ускорить их рост. Основные андрогенные гормоны, такие как тестостерон и андростерон, способствуют белковому синтезу, росту мышечной ткани и костей, увеличению массы тела, а также усиливают процессы тканевого дыхания и накопления энергии.

Считается, что все стероидные гормоны образуются из общего предшественника — холестерола, который, в свою очередь, синтезируется из ацетил-СоА.(ацетил-коэнзим А).

Использование половых гормонов позволяет изменять пол рыб, превращая самцов в самок и наоборот.

Кровь рыб обладает ярко-красным цветом, характерным запахом рыбьего жира, маслянистой консистенцией и солоноватым вкусом. Она выполняет множество важных функций в организме: переносит питательные вещества, выводит шлаки, а также служит переносчиком гормонов, которые выступают в роли химических посредников, транспортируясь от эндокринных желез к органам-мишеням. Кроме того, кровь обеспечивает транспортировку кислорода. Химический состав крови непрерывно меняется, так как она содержит множество различных питательных веществ, промежуточных продуктов обмена, отработанных шлаков и неорганических ионов. Все компоненты крови можно разделить на пять групп:

1. Вода.

2. Неорганические вещества.

3. Органические промежуточные продукты метаболизма.

4. Белки плазмы.

5. Форменные элементы крови (клетки).

Клетки крови рыб можно разделить на три основных типа: эритроциты, лейкоциты и тромбоциты. У большинства видов рыб количество эритроцитов значительно превышает количество других клеток крови. Это связано с приспособлением к различным условиям обитания.

Морфология клеток крови у разных видов рыб значительно различается, что обусловлено адаптацией к окружающей среде. Кроме того, в отличие от высших позвоночных, в крови рыб присутствует значительное количество молодых клеток.

Патологоанатомическое вскрытие — это ключевой метод диагностики большинства заболеваний рыб. Его проводят как на свежих трупах, когда жабры ещё не подверглись разложению, так и на живых рыбах с явными признаками болезни.

Перед тем как умертвить рыбу, убедитесь, что у вас есть все необходимые инструменты. Тщательно промойте их водой или физиологическим раствором. Возьмите несколько предметных стекол и нанесите на каждое по одной-две капли воды, чтобы не тратить время на подготовку после вскрытия.

Перед вскрытием живых рыб обездвиживают различными способами: либо погружают в сон с помощью хлоралгидрата (2,4 г/л), либо разрушают спинной мозг, вводя иглу или делая разрез позвоночника в области затылка.

Настоятельно рекомендую составить краткий отчет по результатам исследования. Поначалу это может показаться лишним, но на практике оказывается весьма полезным. Записывая полученные результаты, вы сможете точно установить, какие рыбоводы или карантинные передержки поставляют нездоровых рыб с одними и теми же возбудителями.

Перед вскрытием сделайте соскоб (мазок) с только что убитой рыбы. Особое внимание уделите наиболее измененным участкам поверхности: белым бугоркам, язвам, различной пигментации, налётам и повреждениям.

Важно помнить: полученный в результате вскрытия материал следует исследовать под микроскопом сразу же. Полученное изображение сравните с описанием возбудителей заболеваний.

Затем острым пинцетом вырвите несколько чешуек и приготовьте препарат путём соскоба (мазка), как было описано ранее.

В местах язв и открытых ран следует взять небольшой кусочек мышечной ткани с помощью острого пинцета или скальпеля. Этот материал также необходимо подготовить для микроскопического исследования.

При внимательном изучении покровных тканей через кожу (чешую) и мышечные волокна можно заметить тёмные пятна. В этом случае следует осторожно выделить их с помощью скальпеля. Такие пятна могут свидетельствовать о наличии трематодоза — заболевания, вызванного личинками сосальщиков, которые выглядят как чёрные точки.

Аквариумные рыбы имеют небольшие размеры, и, соответственно, в них содержится небольшое количество крови. Кровь у рыб свертывается очень быстро, поэтому и нам необходимо действовать быстро и точно.

Для проведения анализа следует заранее подготовить несколько предметных стёкол, на которые нужно капнуть одну-две капли физиологического раствора. Вода для этих целей не подходит, так как она может сильно изменить исследуемый препарат.

Рыбу, выбранную для анализа, следует обработать анестетиком, например, трикаином (MS -222), чтобы она полностью обездвижилась, за исключением дыхательных движений жабр. После этого рыбу умерщвляют, перерезая позвоночный столб.

Затем берём рыбу в руку и прочными ножницами отсекаем хвост или делаем надрез на хвостовом стебле в зоне между анальным отверстием и хвостовым плавником. Из хвостовой артерии по каплям начинает вытекать кровь, которую мы должны быстро наносить на предметные стёкла небольшими порциями. Важно действовать быстро, чтобы кровь не успела свернуться. При наличии опыта, у крупных рыб можно произвести забор крови непосредственно из хвостовой артерии при помощи инсулинового шприца.

В каплю крови, нанесённую на предметное стекло, мы добавляем немного физиологического раствора, перемешиваем всё стеклянной палочкой и сразу же накрываем покровным стеклом, слегка прижимая его. Затем помещаем препарат под микроскоп.

Для проведения такого исследования требуется мощный медицинский микроскоп с качественной оптикой и опыт работы с ним. Под большим увеличением можно увидеть мельчайшие болезнетворные организмы, если они присутствуют среди миллионов кровяных телец.

Патологоанатомическое вскрытие начинают с наружного осмотра, обращая внимание на изменения в кожных покровах, плавниках, глазах и других органах. Затем приступают к вскрытию, которое проходит в следующем порядке:

Внимательно рассмотрим жабры. Для этого нужно скальпелем удалить жаберную крышку. У крупных рыб она окостеневшая, жесткая, прочная, у мелких представляет собой тонкую эластичную пластину. Под крышками открываются дуги, отрезаем ножницами 2-3 жаберные дуги и исследуем под микроскопом.

Чтобы вскрыть брюшную полость рыбы, необходимо сделать два разреза. Первый разрез проходит вдоль белой линии от анального отверстия до межчелюстного пространства. Затем, используя тупой конец ножниц, делают второй полулунный разрез по уровню боковой линии, чтобы отсечь брюшную стенку и обнажить внутренние органы.

Важно выполнять разрезы осторожно, чтобы не повредить внутренние органы. После вскрытия брюшной и сердечной полостей проводят их осмотр, обращая внимание на содержимое, наличие жидкости или газа, а также на внешний вид внутренних органов.

У половозрелых рыб отделяют гонады, обращая внимание на их зрелость, цвет, наличие кровоизлияний и мертвых икринок. Затем, надрезая кишечник в области псевдодиафрагмы и ануса, извлекают внутренние органы.

На первом этапе исследований важно изучить расположение внутренних органов и убедиться в отсутствии крупных паразитов, видимых невооруженным глазом. После этого проводится микроскопическое исследование полостной жидкости, которая может содержать болезнетворные протозойные организмы.

Затем мы готовим препараты для изучения следующих органов: печени, желчного пузыря, селезёнки, глотки (пищевода), желудка, тонкой кишки, прямой кишки, анального отверстия, сердца, плавательного пузыря, почек и гонад (половых органов).

Для приготовления препарата тонкий срез органа кладут на предметное стекло, смачивают небольшим количеством воды или физиологического раствора и накрывают покровным стеклом. Лёгким нажатием пинцета на покровное стекло препарат расплющивают до такой степени, чтобы он стал максимально прозрачным и доступным для микроскопии. Для исследования желудочно-кишечного тракта крупных рыб рекомендуется нарезать фрагменты длиной 1-2 см и, разложив их на предметном стекле, разрезать скальпелем или острыми ножницами.

(Не нужно быть специалистом чтобы понять, что жить такой рыбе совсем недолго).

Для вскрытия черепа применяют четыре разреза: первый — поперечный, которым отделяют крышку у носовых ямок; два боковых разреза проходят от носовых ямок до затылочной области, а четвёртый — в области затылка.

Сначала осматривают оболочку головного мозга, затем извлекают его и оценивают состояние вещества мозга и его кровенаполнение. При осмотре скелетной мускулатуры обращают внимание на её цвет, консистенцию, наличие кровоизлияний, отёков, припухлостей, цист паразитов и степень прикрепления к костям.

Патологоанатомические изменения сопоставляют с клиническими симптомами, что позволяет выявить характерный комплекс признаков основного заболевания и сопутствующих осложнений. Эти данные помогают определить главную и непосредственную причину гибели рыб. Если данные вскрытия вызывают сомнения, проводят гистологическое исследование патологического материала.

Патоморфологическая диагностика типовых патологических процессов в органах и тканях рыб.

При изучении болезней рыб важно понимать, что каждое заболевание представляет собой результат взаимодействия двух противоположных процессов:

1. Патогенного воздействия на организм, вызванного специфическим возбудителем или другими этиологическими факторами.

1. Компенсаторно-приспособительных реакций направленных на восстановление нарушенных функций органов и систем, а также поддержание гомеостаза.

К общепатологическим процессам, которые развиваются в организме животных и человека при болезнях, относятся различные виды дистрофий, нарушения кровообращения, воспаление и регенерация. Если рассматривать эти процессы в эволюционном аспекте, становится очевидно, что у рыб они протекают по тем же общим закономерностям, что и у высших позвоночных. Отличия, если они есть, скорее количественные, чем качественные.

У рыб встречаются практически все виды дистрофий, но особенно часто — зернистая, жировая, гиалиново-капельная и гидропическая. В разных вариантах они ярче проявляются при токсикозах и инфекционных болезнях рыб.

Сосудистые расстройства у рыб обычно имеют системный характер и могут проявляться в различных формах: гиперемии, ишемии, анемии, геморрагиях, а также в локальных и общих отеках. Это связано с особенностями анатомического строения сердечно-сосудистой системы рыб и отсутствием у них лимфатических узлов.

Воспалительная реакция у рыб изучена недостаточно, однако во многом она похожа на воспаление у млекопитающих. Наиболее заметными признаками являются покраснение и опухание тканей. Местная и общая температурные реакции выражены слабо из-за утечки тепла в воду. Внешнее проявление боли у рыб также не очень хорошо дифференцировано.

Сосудистые расстройства у рыб часто сопровождаются массивной транссудацией, экссудацией и эритродиапедезом. Это особенно характерно для многих острых инфекций, протекающих септически, таких как аэромоноз и псевдомоноз. Инфекции проявляются покраснением кожи, отеком рыхлой клетчатки, гидратацией мускулатуры, ерошением чешуи, пучеглазием, а также асцитом.

Для рыб характерно сочетание серозного и геморрагического воспаления. Фибринозное и гнойное воспаления встречаются гораздо реже.

В отличие от млекопитающих, у которых острое воспаление сопровождается перемещением гранулоцитов, у рыб этот процесс протекает менее заметно. Это связано с меньшим количеством и сниженной фагоцитарной активностью нейтрофильных лейкоцитов, которые у рыб присутствуют в меньшем количестве.

Однако предполагается, что нейтрофилы рыб выделяют в месте воспаления пероксиды, которые участвуют в процессе окисления и нейтрализации токсических веществ.

Важным аспектом воспаления у рыб является пролиферация соединительнотканных элементов, которая происходит аналогично другим позвоночным. Особенно заметна эта пролиферация при хронических инфекциях, таких как ихтиофоноз и микобактериоз, а также при некоторых инвазиях.

Интенсивность и характер воспалительной реакции различаются при бактериальных и вирусных инфекциях рыб, что обусловлено особенностями патогенности бактерий и вирусов. Патогенное воздействие бактерий связано с их инвазивностью и токсичностью, что проявляется в сочетании нескольких типов экссудативного воспаления: серозного, серозно-геморрагического, фибринозного (образование экссудата богатого фибриногеном) или гнойного.

При вирусных инфекциях патология начинается с некробиоза и часто завершается некрозом тканей, так как вирусы являются внутриклеточными паразитами.

У рыб хорошо развиты как неспецифические механизмы общей резистентности, так и специфические факторы защиты (иммунитет). Они выполняют компенсаторно-приспособительную функцию при различных заболеваниях.

К неспецифическим факторам защиты у рыб относятся:

• Эпителиальные и эндотелиальные покровы органов;

• Слизь на коже, жабрах и в пищеварительном тракте;

• Высокая регенерационная способность тканей;

• Большое количество лейкоцитов в крови;

• Хорошо развитая мононуклеарная фагоцитарная система, состоящая из клеток ретикулярной, лимфоидной и эндотелиальной тканей, которые рассеяны по всему организму;

• Гуморальные и физиологические реакции организма.

Внешние покровы органов и выделяемая слизь обеспечивают не только механическую защиту. Слизь рыб содержит муциноподобное вещество, глико-нуклеопротеиды, лизоцим, бактериолизины, пропердин, секреторные иммуноглобулины и другие вещества, которые обладают нейтрализующими, кровеостанавливающими, антимикробными и антипаразитарными свойствами. Поэтому повреждение кожи может привести к заражению рыб многими инфекциями и инвазиями, а также к проникновению в организм ядовитых веществ.

Ниже представлены фотографии и рисунки, которые помогут вам запомнить внешний вид паразитов. Это позволит вам в дальнейшем без труда идентифицировать их самостоятельно.

Апиозомоз. Возбудитель апиосома (Apiosoma, раньше Glossatella) и Ambiphrya.

Аргулёз. Argulus - род ракообразных семейства Argulidae из класса Maxillopoda.

Анизакидоз. возбудитель нематоды семейства Anisakidae родов Anisakis, Contracaecum Pseudoterranova и Porrocaecum.

Акантобделёз форелевых —это заболевание, возбудителем которого является пиявка Acanthobdella peledina.

Балантидиоз — это паразитарное заболевание, которое поражает пищеварительный тракт и вызывается реснитчатой инфузорией Balantidium coli.

Ботриоцефалёз— паразитарное заболевание рыб, вызываемое ленточными гельминтами семейства Bothryocephalidae.

Бранхиомикоз. Это грибковое заболевание, поражающее кровеносные сосуды жабр и приводящее к некрозу жабр и массовой гибели рыбы.

Гиродактилёз. Возбудитель -моногенеи рода Gyrodactylus.

Глюгеоз.(микроспоридиоз) Заболевание вызывают споровики Glugea pseudotumefaciens и Glugea hertwigi.

Кариофиллёз.(Гвоздичник). Цестодозные заболевания пресноводных рыб, характери­зующиеся поражениями кишечника. Возбудители относятся к семейству Caryophyllaeidae . Локализация — кишеч­ник.

Дактилогироз. Возбудитель моногенеи из рода (Dactylogyrus).

На картинке показаны отличительные признаки моногеней. Под цифрой 2) Гиродактилус, под цифрой 3) Дактилогирус.

Дифиллоботриоз.Заболевание вызываемое взрослой стадией ленточных червей - лентецов Pseudophyllidae из сем. Diphyllobothriidae.

Гельминт Лигула. Возбудитель лигулёза.

Гексамитоз. Возбудитель -дипломонады Spironucleus.

Глохидиоз — это заболевание рыб, вызываемое личинками двустворчатых моллюсков, известных как глохидии. У пресноводных рыб эти личинки часто встречаются на жабрах и плавниках. Они относятся к классу двустворчатых моллюсков, или Bivalvia.

Диплостомоз — это широко распространённое заболевание пресноводных рыб, вызываемое метацеркариями трематод рода Diplostomum (семейство Diplostomatidae, отряд Strigeidida).

Первая, наиболее распространенная форма — хроническая паразитическая катаракта. Она проявляется помутнением хрусталика под воздействием метацеркарий паразита, которые находятся внутри него.

Вторая, острая форма — церкариозный диплостомоз, который возникает в момент проникновения церкарий паразита в тело рыбы.

Диплозооноз. (Спайник).Паразитарное заболевание свободноживущих и аквариумных рыб, вызываемое плоскими червями из рода Diplozoon.

Дермоцистидиоз. Это заболевание рыб и амфибий, вызываемое одноклеточными организмами неясного систематического положения. Одни иссле­дователи относят этих паразитов к простейшим, другие — к грибам. После долгого препирания биологи отнесли его к типу мезомицетов.

Ихтиофтириоз. Равнореснитчатая инфузория Ichthyophthirius multifiliis, семейства Ophryoglenidae.

Ихтиободоз. (Костиоз). Возбудитель -жгутиконосец Ichthiobodo necator (Costia necatrix) относится к сем. Bodonidae, отряду Kinetoplastida.

Ихтиофоноз — это заболевание рыб, вызываемое грибком Ichthyosporidium (Ichthyophonus) hoferi. Этот небольшой лишайник, представляющий собой смесь гриба и водоросли, имеет шарообразную или яйцевидную форму.

Во внутренних органах рыб этот грибок размножается путём деления, образуя круглые и прозрачные цисты, достигающие размера макового зерна. Внутри цист находятся плазмодии — скопления нескольких сотен круглых ядер с шаровидным внутриядерным тельцем, окружённые толстой оболочкой. При созревании эта оболочка лопается, выпуская дочерние плазмодии, которые затем развиваются во взрослые грибы.

Кокцидиозный энтерит — это заболевание рыб, которое можно диагностировать с помощью микроскопического исследования соскобов слизистой оболочки кишечника.

Криптобиоз. Паразитарное заболевание, которое вызывают жгутиконосцы отряда Bodonidae рода Cryptobia.

Криптокарионоз. Морской ихтиофтириус.

Капилляриоз. Возбудитель нематода Capillaria pterophylli.

Кариофиллёз. (Кавиоз). Возбудителями являются цестоды Khawia sinensis и Caryophyllaeus fimbriceps. Паразитируют в кишечнике.

Камалянус — род круглых червей, или нематод, относящийся к семейству Camallanidae. Среди аквариумных рыб чаще всего встречается Camallanus cotti — паразит, достигающий в длину 12 мм. Он был завезён в 1967 году с Дальнего Востока вместе с импортными аквариумными рыбками.

В естественной среде обитания жизненный цикл камалянуса включает веслоногого рачка, который выступает в роли промежуточного хозяина. Однако в условиях аквариума паразиты способны размножаться без участия этого рачка на протяжении нескольких поколений.

Лернеоз. Возбудитель-самки паразитических рачков из рода Lernaea.

Метацеркарии. Личиночный трематодоз.

Миксоспоридии рода Myxobolus у рыб могут выглядеть по-разному в зависимости от места паразитирования:

• При паразитировании в желчном и мочевом пузырях, в мочевых канальцах почек и мочеточниках вегетативные стадии представлены подвижными многоядерными амебоидами.

• При паразитировании в тканях вегетативные стадии обычно принимают вид овальных или округлых неподвижных образований, внешне напоминающих цисты, одетые соединительнотканной оболочкой, выделенной хозяином.

Микобактериоз, или туберкулёз рыб — это опасная болезнь, которую можно обнаружить под микроскопом. В процессе исследования можно заметить характерные кислотоустойчивые палочки, окрашенные в ярко-красный цвет.

При вскрытии рыбы так же можно увидеть скопления гранул неправильной формы, так называемые узелковые утолщения, во внутренних органах. Эти образования представляют собой колонии туберкулёзных бактерий, окружённые соединительной тканью рыбы.

Оодиниоз. Возбудитель- жгутиковые динофлагелляты из родов Oodinium pillularis и O.Limneticum. Относятся к классу Phytomastigophorea отряду Dinoflagellida.

Описторхоз — это заболевание из группы трематодозов, которое вызывают паразитические плоские черви рода Opisthorchis: Opisthorchis felineus и Opisthorchis viverrini.

Плистофороз — это смертельное инвазионное заболевание аквариумных рыб, вызываемое споровиками отряда Microsporidia

Писциколёз— это заболевание, при котором пиявки, кровососущие паразиты, локализуются на туловище, вокруг глаз, в ротовой полости и иногда на жабрах рыб.

Синэргазилез — это паразитарное заболевание растительноядных рыб, которое вызывают самки рачков рода Sinergasilus (s. major и s. lieni), обитающие на жабрах.

Эти рачки строго специфичны и поражают только белый амур — s. major — и толстолобиков — s. lieni. Они были завезены на европейскую территорию России вместе с этими видами рыб из Китая и реки Амур в процессе их акклиматизации.

Триходиниоз (Trichodinosis) — это инвазионное заболевание, поражающее прудовых и аквариумных рыб. Его вызывают паразитические инфузории из рода Trichodina.

Тетрахименоз.Возбудитель — инфузория Tetrahymena.

Трихофриоз — это заболевание рыб, вызываемое паразитическими инфузориями из семейства Trichophryidae, рода Capriniana. Эти паразиты прикрепляются к жабрам рыб и питаются кровью, высасывая её из жаберных сосудов.

Постодиплостомоз. Заболевание рыб, которое относят к инвазивному типу и вызывается дигенетическими сосальщиками. Гельминты селятся непосредственно в кишечнике, иногда локализуются и в мышцах на глубине до 2 мм. Больная рыба покрывается темными пятнами различных размеров. Пятна появляются при активности личинок гельминтов. Из-за специфического вида это заболевание также называют черно-пятнистой заразой.

Хилодонеллёз. Инвазионное заболевание, вызываемое инфузориями рода Chilodonella.

Эпистилиоз — это заболевание, вызываемое колониями сидячих инфузорий из рода Heteropolaria.

Эргазилёз. Возбудителями эргазилеза рыб являются паразитические рачки рода Ergasilus.

Андреев Р.С. Гидробиолог. Компания «Lenfish». ©